毕业生疾控中心实习目的
一、实习目的
实习是学生大学学习很重要的实践环节。实习是每一个大学生的必修课,它不仅让我们学到很多在课堂上根本就学不到的知识,还能使我们开阔视野,增长见识,为我们以后更好把所学的知识运用到实际工作中打下坚实的基础。
这次有机会能够到疾控中心实习,我感到很庆幸。虽然只有两周的时间,但是在几位老师的帮助下,我对于微生物基础知识有了更加深层次的理解,增加了对微生物知识的感性认识,锻炼和提高了独立分析和解决实际问题的能力。与老师相处了两周,老师很热心和真诚,尽心尽力的将实验操作的技能和要点传授给我,为人很和善,包容我的错误,让我有了很大的进步。
二、实习内容
第一天在老师的带我们去单位了解一下环境和认识一下老师。到达后李老师负责我们这次实习的全过程,她将实习过程的注意事项和规章制度,并且了解各个实验室里面的大型仪器。
老师告诫我们到实习单位后一定要跟带领我们的老师的作息时间一致,不可以早退,不能偷懒,一定要把实验室的卫生搞好。我们即将进入社会,在如何与人相处,处理好人际交往进行锻炼和提升,听到老师的一席话,我受益匪浅,暗暗下决心,一定要好好的实习和学习,不给学校丢脸。
这次实习,由于老师们正在进行的前期实验都已完成,所以我们在这段时间主要进行《食品安全国家标准----菌落总数测定》的培训。
开始时自己就是跟在实习老师的后面打打下手,帮忙拿溶剂,洗瓶子,称量等。在实习老师的指导带领下,我对实验室分析的内容慢慢的有了很深的了解,自己在一个多星期的学习下也能独立完成一些简单实验。
主要实验是菌落总数的'检验,程序如下:
样品的稀释
固体和半固体样品:称取25 g样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10的样品匀液。
液体样品:以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。
用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。
按1.3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1 mL无菌吸管或吸头。
根据对样品污染状况的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1 mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1 mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
及时将15 mL~20 mL冷却至46 ℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
培养
待琼脂凝固后,将平板翻转,36 ℃±1 ℃培养48 h±2 h。水产品30 ℃±1 ℃培养72 h±3 h。6.2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4 mL),凝固后翻转平板,按6.2.1条件进行培养。
菌落计数
可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
选取菌落数在30 CFU~300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 CFU的平板记录具体菌落数,大于300 CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
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