苦石莲总提取物对肝损伤的保护作用分析
1 材料与仪器
1.1 药物苦石莲总提取物由大理学院药学院天然药物化学实验室提供(苦石莲购买于大理地区,经大理学院药学院马晓匡教授鉴定为云实属南蛇?的干燥成熟种子)。
1.2 动物昆明种小鼠(普通级),雌雄各半,体质量18~22 g,由云南生物制药有限公司提供,合格证号:SCXK(滇)2005-0007。
1.3 试剂联苯双酯滴丸(浙江医药股份有限公司新昌制药厂,批号:061003);D-半乳糖胺(上海楷洋生物技术有限公司,批号:G0500);酒精(天津市化学试剂三厂);谷丙转氨酶(ALT)测定试剂盒(四川省成都市迈克科技有限责任公司提供,批号:0907061);谷草转氨酶(AST)测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司提供,批号:20070725)。
1.4 仪器台式高速冷冻离心机(TL-16K,上海市离心机械研究所);722型光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂);电子天平(EL104,梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
2方法
2.1 对D-GalN所致急性实验性肝损伤的影响[3~6]取健康小鼠84只,雌雄各半,随机分为6组,每组14只,分别为正常组、模型组、联苯双酯组(0.45g·kg-1)、苦石莲高剂量组(0.84 g·kg-1)、苦石莲中剂量组(0.56g·kg-1)、苦石莲低剂量组(0.28g·kg-1)。联苯双酯组、苦石莲高、中、低剂量组小鼠均按20ml·kg-1灌胃给药,正常组及模型组小鼠灌胃给等体积生理盐水,2次/d,连续给药7d。于第7天第2次给药1h后,除正常组外,其余各组小鼠均腹腔注射D-GalN,0.45g·kg-1,正常组小鼠腹腔注射等体积蒸馏水。末次给药16h后摘眼球取血,分离血清,检测ALT、AST活性。采血后,迅速颈椎脱臼处死小鼠,取出整个肝脏用生理盐水漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,计算肝脏系数。
2.2 对酒精所致实验性肝损伤的.影响[3,4,6]分组及给药方法同“2.1”项,于第7天第2次给药8h后,除正常组外,其余各组小鼠均灌胃给 50度酒精溶液,20ml·kg-1,正常组小鼠灌胃给等体积蒸馏水。末次给药4h后摘眼球取血,分离血清,检测ALT、AST活性。取肝脏称重,计算肝脏系数。
2.3 计算肝脏系数肝脏系数=肝脏重量(mg)/体质量(g)×100%
3 结果
苦石莲总提取物对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响对血清ALT、AST的活性和肝脏系数的影响。结果见表2。由表2可知,与正常组比较,酒精模型组血清ALT、AST活性和肝脏系数显着升高(P<0.01),表明造模成功;与模型组比较,苦石莲各剂量组均能明显抑制血清ALT、AST和肝脏系数的升高,除低剂量组肝脏系数无差异外,其余各组均有显着性差异(P<0.01或P<0.05)。结果显示苦石莲总提取物对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤有一定的保护作用。
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