橘核质量的测评实验报告

1仪器与试药

1.1仪器

天美LC2000型高效液相色谱仪（LC2030检测器、LC2130泵、L-2200自动进样器），T2000P色谱工作站；BP211D型电子分析天平（德国sartorius 公司），LK-400药用粉碎机（浙江城关红利数控制造厂）。

1.2试药

橙皮苷对照品（批号：110721-200613，供含量测定用）购自中国药品生物制品检定所；橘核药材分别购自广东康美药业（1）、广州致信药业（2）及广州市采芝林连锁药店（3），经广州中医药大学中药学院陈康教授鉴定皆为橘Citri Reticulatae Blanco的干燥种子；流动相所用甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件与系统适用性

色谱柱：安谱公司Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-36%（体积分数）乙酸-水（体积比38∶2∶60）；流速：1.0 mL·min-1;检测波长：285 nm;柱温：25 ℃。分别精密吸取对照品、供试品溶液各10 μL注入液相色谱仪中，记录色谱图，见图1。

2.2线性关系考察

精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液 0.5、1、2.5、5、7.5、10 mL，分别置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取10 μL进样。按“2.2”项下色谱条件进行测定，测定峰面积。以峰面积积分值（Y）为纵坐标，橙皮苷对照品进样量（X）为横坐标进行线性回归，得回归方程为：Y=2×106X-1?4823×104，r=0.999 9。结果表明，橙皮苷在0?103～2.060 μg之间线性关系良好。[PSd201;S*2〗A.橙皮苷对照品； B.橘核供试品图1 橘核HPLC图Figure 1HPLC chromatograms

2.3精密度试验

精密吸取橙皮苷对照品溶液（0.206 mg·mL-1）10 μL，注入液相色谱仪，重复进样6次，测定橙皮苷色谱峰峰面积，RSD为1.82%（n=6），表明仪器精密度良好。取第3批的橘核样品6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，分别进样10 μL，测定橙皮苷峰面积，计算含量，其RSD为2.50%（n=6），表明该方法重复性良好。取同一份供试品溶液（第3批），分别在0、3、6、12、18、24 h精密吸取10 μL，注入液相色谱仪，测定橙皮苷峰面积，计算含量，其RSD为1.76%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。取已知橙皮苷质量的样品（第1批）6份，每份取约1 g，精密称定。分别准确加入质量浓度为0?206 mg·mL-1的橙皮苷对照品溶液1 mL，混合后挥干甲醇。按“2.1.2”项下方法制备回收率供试样品溶液，依法进行测定，计算回收率。结果见表1。表1回收率试验结果

3结果

橘核为种子类药材，富含脂肪油。试验对脱脂后甲醇提取样品溶液和不经脱脂直接用甲醇提取的'样品溶液进行了比较研究，结果发现未经脱脂而直接提取的样品干扰成分较多，峰形较差。此外，样品中的脂肪油对柱体污染性较强，所以制备样品溶液时应该先以石油醚脱脂，再以甲醇提取。试验对常用的流动相系统如甲醇-水、乙腈-水、甲醇-酸水及各系统组分不同比例间进行了比较，结果表明采用甲醇-36%（体积分数）乙酸-水（体积比38∶2∶60）进行洗脱效果为佳。在该条件下橙皮苷分离度良好，峰形窄而对称，且不受其他峰的干扰。